iPS 細胞等の幹細胞を利用する手法が現在の再生医学では主流であるが、幹細胞から肺上皮細胞を得るには、発生段階をなぞり分化過程の各段階で複雑に培養条件を変化させる必要があり煩雑である。また幹細胞の使用には腫瘍形成のリスクがある。現在までiPS細胞の関連技術の向上で、より簡潔で低造腫瘍性の手法が行われつつあるが、コストや細胞の準備期間や品質等の問題から自身の細胞由来のiPS 細胞の使用は困難であり、再生医療の実用化のためにはより簡潔な新規手法の確立が必要である。終末分化した体細胞に特異的因子を導入して、幹細胞を経ずに目的の細胞を直接誘導する直接リプログラミングが近年新しい再生医療の手法として注目されている。本研究ではこの直接リプログラミングの技術を用いて、肺上皮細胞の誘導を試みることとした。すでに我々はこれまでの研究によりマウスで４因子を導入することで２型肺胞上皮細胞のマーカーであるＳＰ－Ｃ高発現の２型肺胞上皮様細胞の導入に成功し、国際特許（ＰＣＴ）出願を行い、各国出願（日本、米国、欧州）を完了している。Sftpcリポーターマウスから得た胚性線維芽細胞から肺上皮様細胞を誘導し、オルガノイド培養条件で培養を行い、SftpcにてFACSソートを行い3カ月以上の継代が可能となった。FACSソート後の誘導細胞は、RNA-seq 解析により9割以上が2型肺胞上皮細胞に近似していた。今後in vivoモデルで検討を行いたい。
iPS cells are a major tool for regenerative medicine, but preparing pulmonary epithelial cells induced from iPS cells is time-consuming and has a risk for tumorgenesis. Although these problems are on the way to resolving by improvement of recent technique, using own iPSL cells is still difficult due to cost and quality of the cells. Therefore new strategy for preparing pulmonary cells is needed. Direct reprogramming is a new tequnology for inducing indended cells. We have already succeeded for inducing murine SP-C+ type II alveolar epihtelial-like cells using direct reprogramming teqnique by forced induction of selected 4 factors. We have applied international patent (to Japan, U.S.A, and Europe). Lung epithelial-like cells were induced from embryonic fibroblasts (MEFs) obtained from Sftpcreporter mice, cultured under organoid culture conditions, and FACS-sorted with Sftpc, allowing for passaging for more than 3 months. More than 90 percentage of the induced cells after FACS-sorting approximated type 2 alveolar epithelial cells by RNA-seq analysis. We are trying to examine this technique in vivo model.

申請種類 : 福澤基金研究補助