慶應義塾大学学術情報リポジトリ(KOARA)KeiO Associated Repository of Academic resources

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KAKEN_26461019seika  
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Release Date
 
Title
Title 新規の遺伝子網羅的解析法による肝細胞癌分子標的薬に対する薬剤耐性遺伝子の同定  
Kana シンキ ノ イデンシ モウラテキ カイセキホウ ニ ヨル カンサイボウガン ブンシ ヒョウテキヤク ニ タイスル ヤクザイ タイセイ イデンシ ノ ドウテイ  
Romanization Shinki no idenshi morateki kaisekiho ni yoru kansaibogan bunshi hyotekiyaku ni taisuru yakuzai taisei idenshi no dotei  
Other Title
Title Comprehensive screening of genes resistant to sorafenib in hepatocellular carcinoma  
Kana  
Romanization  
Creator
Name 阿部, 雄太  
Kana アベ, ユウタ  
Romanization Abe, Yuta  
Affiliation 慶應義塾大学・医学部・講師  
Affiliation (Translated)  
Role Research team head  
Link 科研費研究者番号 : 70327526

Name 林田, 哲  
Kana ハヤシダ, テツ  
Romanization Hayashida, Tetsu  
Affiliation 慶應義塾大学・医学部・講師  
Affiliation (Translated)  
Role Research team member  
Link 科研費研究者番号 : 80327543
Edition
 
Place
 
Publisher
Name  
Kana  
Romanization  
Date
Issued (from:yyyy) 2017  
Issued (to:yyyy)  
Created (yyyy-mm-dd)  
Updated (yyyy-mm-dd)  
Captured (yyyy-mm-dd)  
Physical description
1 pdf  
Source Title
Name 科学研究費補助金研究成果報告書  
Name (Translated)  
Volume  
Issue  
Year 2016  
Month  
Start page  
End page  
ISSN
 
ISBN
 
DOI
URI
JaLCDOI
NII Article ID
 
Ichushi ID
 
Other ID
 
Doctoral dissertation
Dissertation Number  
Date of granted  
Degree name  
Degree grantor  
Abstract
各細胞株のTTCを作成した。MTT assay法により薬剤指摘濃度を確認した後に樹立したTTCを用いてソラフェニブを添加した。その結果HepG2については約10種類, PLC/PRF/5については約20種類のコロニーがピックアップされた。ゲノムDNAを抽出しソラフェニブ耐性遺伝子の候補遺伝子を同定することが可能であった。DNAを抽出し, トランスポゾンにより挿入された箇所を制限酵素処理にて切り出しDNAを増幅させ, その塩基配列を同定し, 遺伝子を同定した。複数の耐性コロニーに共通して出現している遺伝子が幾つか同定され, これが投与薬剤に対する耐性遺伝子候補としてピックアップされた。
We used a novel method involving transposons to screen and identify drug-resistant genes. Transposons are DNA sequences that move from one location on the gene to another. A modified piggyBac transposon was designed as an insertion mutagen, and a cytomegalovirus (CMV) promoter sequence was added to induce strong transcription. When the transposon is inserted to the upstream of a certain gene, the gene will be overexpressed while when intserted down or intragenically, it will be downregulated. After establishing a transposon-tagged cell library, we treated cell lines derived from Hepatocellular carcinoma. We performed splinkerette PCR and TOPO cloning on the resistant colonies. Bacterial colonies were sequenced, and next-generation sequencing was used to identify the overexpressed/downregulated sequences as candidate genes for Sorafenib resistance. We identified several candidate genes from 30 resistant colonies.
 
Table of contents

 
Keyword
肝細胞癌  

化学療法  

ソラフェニブ  
NDC
 
Note
研究種目 : 基盤研究(C)(一般)
研究期間 : 2014~2016
課題番号 : 26461019
研究分野 : 消化器外科
 
Language
日本語  

英語  
Type of resource
text  
Genre
Research Paper  
Text version
publisher  
Related DOI
Access conditions

 
Last modified date
Aug 05, 2019 09:09:44  
Creation date
Sep 21, 2017 15:41:03  
Registerd by
mediacenter
 
History
Aug 5, 2019    著者,著者版フラグ を変更
 
Index
/ Public / Grants-in-Aid for Scientific Research / Fiscal year 2016 / Japan Society for the Promotion of Science
 
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