生体外における肝臓再生を目指す肝臓組織工学において、肝細胞に毛細胆管を形成させる培養法や胆管上皮細胞に胆管を形成させる培養法は報告されていたが、これらを融合することによって毛細胆管と胆管が直接接合した肝組織を構築する手法は確立されていなかった。本研究では、コラーゲンゲルサンドイッチ培養法を基本としたラット初代培養肝細胞および胆管上皮細胞の共培養における播種濃度やタイミングを検討することで、毛細胆管と胆管の接合を誘導し、蛍光色素の排出や免疫蛍光染色によって、胆管と毛細胆管が直接接合していることを立証した。さらに、接合位置を調節するための新たな培養デバイスを開発した。
In liver tissue engineering for liver regeneration in vitro, a culture method for constructing bile canaliculi by hepatocytes and a culture method for constructing bile ducts by biliary epithelial cells have been reported. However, a method for constructing liver tissue, in which bile canaliculi and bile ducts are directly connected, has not been established. In this study, the connection of bile canaliculi and bile ducts were induced in the coculture of primary rat hepatocytes and biliary epithelial cells by investigating the seeding concentration and timing in collagen gel sandwich culture. Furthermore, we demonstrated that bile canaliculi and bile ducts are directly connected using fluorescence imaging and immunocytochemistry. A new culture device was also developed to regulate the position where bile canaliculi were directly connected to bile ducts.

研究種目 : 挑戦的研究 (萌芽)
研究期間 : 2020～2021
課題番号 : 20K21908
研究分野 : 組織工学