マウス膀胱癌細胞株MBT-2に緑色蛍光タンパク質GFPを遺伝子導入してMBT-2GFP+細胞を樹立、マウス膀胱に移植して正所性膀胱がんモデルマウスを作製した。
モデルマウスにBCGを投与し、GFPで標識されたがん細胞を回収、シングルセルRNAシークエンスを行った。
バイオインフォマティクス解析では、BCG投与により細胞増殖を促進するKRASシグナル伝達関連遺伝子の発現が上昇する細胞集団が誘導される可能性が示された。
The green fluorescent protein (GFP) gene was introduced into mouse bladder cancer cells MBT-2, and MBT-2GFP+ cells were established. The MBT-2GFP+ cells were orthotopically implanted into the urinary bladder of C3H/H3 mice to create an orthotopic bladder cancer mouse model.
The mice were given BCG through the urethra, the bladders of the mice with tumors were extirpated, then suspended in single cell solution. The GFP-recombinant tumor cells were sorted using fluorescence-activated cell sorting, then single-cell RNA-sequencing  was performed using iCell8.
Bioinformatics analysis suggested that a specific tumor cell subpopulation with elevated transcriptomes associated with the KRAS signaling pathway are induced after BCG therapy.

研究種目 : 基盤研究 (C) (一般)
研究期間 : 2020～2022
課題番号 : 20K09549
研究分野 : 尿路悪性腫瘍、がん免疫療法、シングルセル解析