薬剤誘発性に複製開始する条件複製開始型の腫瘍溶解ウイルスと神経幹細胞を用い た、膠芽腫に対する複合的ウイルス療法の開発を試みた。薬剤(Dox)誘発性にICP4を発現するシャトルプラスミドを作成し、これを遺伝子導入した細胞株に於いては、Dox存在下でICP4発現すること、複製不能型HSV d120がプラーク形成することを確認した。また、d120の細胞障害性は適度であり、膠芽腫に対する治療として、神経幹細胞をcell carrierとして用いる手法の妥当性を確認した。In vivoでは腫瘍幹細胞がヒト膠芽腫に類似した組織像を呈する脳腫瘍を形成することを確認した。
We attempted to establish an effective therapy against malignant gliomas, using a combination of conditionally replicating oncolytic virus and neural stem cells. To effectively target malignant cells that diffusely invade brain parenchyma, we designed an oncolytic virus which starts lytic replication only under doxycycline (Dox). We constructed a shuttle plasmid that starts translation of ICP4 in the presence of Dox, and confirmed that d120, a replication incompetent HSV mutant, forms plaques in cells transfected by the plasmid, only in the presence of Dox. Also, in vitro, we evaluated cytotoxicity of d120 against human neural stem cells. We concluded that the strategy was feasible, as d120 was appropriately attenuated for this purpose. We confirmed that patient derived glioma stem cells readily form tumors in the brains of nude mice, and that those tumors pathologically resemble brain tumors in patients.  Likewise, mouse glioma stem cells form invasive brain tumors in wildtype mice.

研究種目 : 基盤研究(C)(一般)
研究期間 : 2016～2018
課題番号 : 16K10769
研究分野 : 悪性脳腫瘍のウイルス療法