前年度より継続して、Villin-Cre マウスとMR-flox マウスの交配により得られた腸管MR欠損マウス（腸管MRKO）を用いて、5週齢より高脂肪食（HFD）負荷を行い、サンプル数を増やして再解析を行った。体重、血圧に加え、血液・尿・便の生化学的指標の評価も行った。Controlマウス（Control）および腸管MRKOともに、体重の増加を認めたが、HFD負荷開始後20～25週において、腸管MRKOにおける体重抑制が認められた。血圧においても、腸管MRKOで抑制傾向が認められたが、有意差は認めなかった。便中Na排泄は、腸管MRKOにおいて有意に高値であり、代償的に、腸管MRKOでは尿中Na排泄の低下が認められた。尿中アルブミン排泄は、HFD負荷週数が進むにつれ、増加を認め、腸管MRKOでは尿中アルブミン上昇の抑制傾向がみられたが、controlとの群間に有意差は認めなかった。血中レニンおよびアルドステロン値には、群間で差を認めなかった。6時間空腹後の血糖の評価も行ったところ、腸管MRKOで低値傾向を示したが、群間で有意な差は認めなかった。HFD負荷で、両群間に体重の差が認められたため、続いて、カロリー制限食（CR）負荷を行った。CR負荷後4週において、Controlおよび腸管MRKOともに体重減少が認められたが、両群間で有意差は認めなかった。腸管におけるMRの発現は、大腸のみならず、小腸にも広く発現を認める。これまでの検討から、Na吸収を担う上皮性Naチャネル（ENaC）の発現が、腸管MRKOにおいては有意に抑制されており、そのことがNa吸収および血圧調節に強く関与していることを明らかにしているが、小腸においては、ENaCβおよびENaCγは発現を認めず、小腸MRは別の遺伝子を介してその機能を担っている可能性が示唆される。現在、小腸および大腸それぞれからmRNAを抽出し、Controlおよび腸管MRKOにおける遺伝子の発現比較を、マイクロアレイ解析を用いて行っている。
As previously reported, we generated intestinal epithelial cell-specific MR knockout mice (IEC-MRKO) through crossbreeding of Villin-Cre mice and MR-flox mice and demonstrated that IEC-MR is involved in blood pressure regulation through colonic epithelial Na channel (ENaC). We extended the analysis of IEC-MRKO by increasing the sample size of mice loaded with high fat diet (HFD). The gain of body weight under HFD was suppressed in IEC-MRKO compared with control group. The blood pressure aldo tended to be lower in IEC-MRKO, but the difference in control and IEC-MRKO was not statistically significant. The fecal Na excretion was higher in IEC-MRKO and urinary Na excretion was compensatorily lower in this model. HFD-induced urinary albumin also tended to be lower in IEC-MRKO, but the differnce in two groups was not statistically significant. The fast blood sugar tended to be lower in IEC-MRKO, too. Next, we employed the caloric restriction and compared two groups, but the body weight and blood pressure were not different, either. In our model, ENaCβ and γ were proved to be important effectors of IEC-MR, but they are exclusively expressed in the colon and not expressed in the jejunum and ileum. Now we are eploring the potential target genes of MR in the small intestine through microarray analysis for each portion of intestinal tract.