Thai北部ミャンマー国境地域の3つの学校に通う小児(4-17歳)から採取した便1233検体を用いて、腸管寄生虫感染症の有無について直接検鏡を行った。腸管寄生虫は396例（32％）に陽性、このうち蠕虫（回虫、鞭虫等）は87例に陽性、原虫に関しては、Blastcystis hominis 130例(10.5%)、Endolimax nana 123例 (9.94%)、Entamoeba coli 111例(8.97%)、Entamoebahistolytica/dispar 35例(2.83%)、Giardia intestinalis 60例 (4.85%）に陽性であった。また、主にヒトに感染するEntamoeba3種についてPCRによる解析を行い、E. histolytica 30例 (2.43%)、E. dispar 49例 (3.96%)、E.coli 271例 (21.9%)に陽性であった。
また、これら便サンプルから得られたDNA検体から、Entamoeba種陽性例を含めた189検体（平均年齢12歳、男女比有意差なし、E. histolytica陽性29例, E. dispar陽性52例, E.coli陽性62例,陰性69例）をランダムに抽出し、当研究室で得られている知見や過去の報告からEntamoeba種の増殖に関連があると考えられる細菌5菌種（Desulfovibrio desulfuricans、Bacteroides fragilis、Prevotera copri、lactobacillus acidophilus 、Bifidobacterium bifidumn）について、Entamoeba種感染の有無による腸管内保有菌量の差があるかを検討した。各便検体0.2gから抽出したDNAを各20ng用いて、各菌種の16SrRNA領域に設定したプライマーを用いたqPCRを行い、検量線から各Sampleに含まれるDNA量を換算した。現在結果をSSPE統計解析ソフトを用いて解析中である。
また、研究協力者である荒井（大阪大学）が構築した方法でスクリーニングした新規の海洋薬用資源（底生海洋生物や海洋微生物の抽出物）を用いて、赤痢アメーバ無菌培養株、同共棲培養株に対する抗菌活性を確認し、数種の抽出物に赤痢アメーバ無菌株には作用せず、共棲培養株にのみ作用する抗菌活性を見出しており、今後動物実験で効果を解析していく予定である。
We investigated 1233 stool samples from school children in northern region of Thailand, along the border with Myanmar.
In direct smear investigation, the overall rate of intestinal parasites was 396 (32%). The helminths involving the digestive system (ex, Ascaris lumbricoides, Trichuris trichura) were found in 87 samples. As for protozoa, Blastcystis hominis in 130 (10.5%), Endolimax nana in 123 (9.94%), Entamoeba coli in 111 (8.97%), Entamoeba histolytica/dispar in 35 (2.83%) and Giardia intestinalis in 60 (4.85%) samples.
And we investigated using quantitative polymerase chain reaction (qPCR) to define the relative abundances of selected bacterial species/group (Bacteroides, Bifidobacrterium, Lactobacillus, Sulfate-reducing bacteria, and Prevotella group) using genus specific primers in healthy (n=63) and Entamoeba spp. infected (E. histolytica (E.h) positive n=29, E. dispar (E.d) n=52,E. coli (E.c) n=62) stool samples. Now we are doing the statistical analysis for the differences using SSPE statistics25 software.
And we also investigated the activities of some marine medical resources those screened by Arai(researdh collaborater; Osaka university) for Entamoeba histolytica cultured in both axenic and xenic condition. Now we found some canditdates those have activity for Entamoeba histolytica only in xenic culture.
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